在日常細胞實(shí)驗中，我們經(jīng)常需要計算細胞濃度，以進(jìn)一步確定接種濃度或細胞數量。盡管自動(dòng)細胞計數儀提供了快速性，但對于某些細胞，尤其是那些處于復雜狀態(tài)的細胞，有研究表明其分析性能并不一致^[1]（對于細胞形態(tài)的識別，所采用的是不一樣的方法）。

在臨床實(shí)踐中，因血細胞自動(dòng)計數儀通常無(wú)法精準地識別細胞形態(tài)，所以需使用經(jīng)典的血細胞計數板進(jìn)行儀器校準。利用顯微鏡手動(dòng)進(jìn)行細胞計數，這種方法已經(jīng)被廣泛認可^[2]。

血細胞計數板規格及計數原理
血細胞計數板是一種經(jīng)典的細胞計數工具，具有上下兩個(gè)計數池。

在其上方覆蓋蓋玻片，形成深度為0.10mm的計數池。每個(gè)計數池分為9個(gè)大格，每個(gè)大格的規格為1.00mm×1.00mm。因視野所限，不易操作，容易造成較大誤差，所以一般采用定點(diǎn)（計數室4個(gè)角的大方格）取樣計數。（直徑較小的細胞如紅細胞，采用中間一個(gè)大方格內標準5個(gè)區域采集計數）

細胞濃度=（四個(gè)大方格的細胞數之和）/4×稀釋倍數×10⁴個(gè)Cell/mL


博大博聚細胞計數儀的計數之道
博大博聚細胞計數儀，沿用經(jīng)典血細胞計數板的計數原理進(jìn)行研制（JJG 552-1988 血細胞計數板試行檢定規程），并可搭載一次性細胞計數片，其細胞計數片與標準血細胞計數板的計數池高度相同。

①在使用血細胞計數板計數時(shí)，儀器相當于一個(gè)自帶電腦的自動(dòng)化顯微成像系統，屏幕能夠提供細胞高清圖像的實(shí)時(shí)預覽，精密的三軸聯(lián)動(dòng)控制系統，實(shí)現目標視野的精準走位，實(shí)時(shí)自動(dòng)調焦，保證圖片的清晰度，并通過(guò)算法自動(dòng)進(jìn)行識別與計數。

②在使用一次性細胞計數片時(shí)，儀器屏幕會(huì )顯示虛擬刻線(xiàn)，刻線(xiàn)對應的實(shí)際大小經(jīng)“仿細胞校準板(發(fā)明zhuanli號：ZL 2020 21855359.4)"嚴格標定，與血細胞計數板上的刻線(xiàn)面積（1*1mm²）一致。

③一次性細胞計數片的空腔高度設計嚴格標定為0.1mm，計數體積（0.1mm³）與血細胞計數板一致。
④在兩種耗材上，博大博聚細胞計數儀都采用標準的濃度計算公式，細胞濃度=（四個(gè)大方格的細胞數之和）/4×稀釋倍數×10⁴個(gè)Cell/mL。

這使得博大博聚計數儀能夠實(shí)現計數結果人工核對。

注意：個(gè)別型號不做兼容血球計數板的設置，但是設計原理相同（具體信息請咨詢(xún)博大博聚科技有限公司）


博大博聚的細胞計數新范式
博大博聚細胞計數儀支持非染色（發(fā)明zhuanli號ZL 2013 1 0101403.0）、臺盼藍染色和熒光染色等多種計數模式。

儀器預設多種細胞樣本類(lèi)型，對于更復雜的細胞樣本，可通過(guò)自定義輔助判讀，以尋找適合不具代表性樣本的識別參數并可無(wú)限新增。


無(wú)論是秉持傳統方法還是融合創(chuàng )新思路，博大博聚計數儀都旨在為細胞計數和分析提供更全面的解決方案。


參考文獻
[[1]] .Borzova E. The Absolute Basophil Count. Methods Mol Biol. 2020;2163:109-124.
[[1]] Zhang M, Gu L, Zheng P, et al. Improvement of cell counting method for Neubauer counting chamber. J Clin Lab Anal. 2020;34:e23024.